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土壤β-木糖苷酶(Solid-β- xylosidase, S-β-XYS)測(cè)定試劑盒說(shuō)明書
分光光度法 50 管/24 樣
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細(xì)菌和真菌等生物體,是催化木聚糖類半纖維素降解的關(guān)鍵酶,產(chǎn)物木糖可作為碳源應(yīng)用于微生物發(fā)酵。另外,β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應(yīng)用于造紙工業(yè),比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保,具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。
S-β-XYS 催化對(duì)硝基苯酚-β-D-木糖苷產(chǎn)生對(duì)硝基苯酚,對(duì)硝基苯酚在 405nm 處有特征吸收峰,測(cè)定405nm 光吸收增加速率,可計(jì)算S-β-XYS 活性。
產(chǎn)品名稱 | BO6094-50T/24S | Storage |
提取液:液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一:液體 | 2ml | 4℃避光 |
試劑二:液體 | 20ml | 4℃ |
試劑三:液體 | 20ml | 4℃ |
說(shuō)明書 | 一份 |
自備儀器和用品:
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 ml 玻璃比色皿和蒸餾水。
約 0.1g 鮮土或風(fēng)干土樣,加入 1ml 提取液進(jìn)行冰浴勻漿,室溫振蕩提取 30min,然后 10000g,4℃,離心 10min,取上清待測(cè)。
1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 405nm。
2、操作表
對(duì)照管 | 測(cè)定管 | |
樣本(μl) | 200 | 200 |
試劑一(μl) | 50 | |||
試劑二(μl) | 400 | 350 | ||
混勻,45℃水浴 20min | ||||
試劑三(μl) | 400 | 400 | ||
混勻,靜置 5min,405nm 處測(cè)定吸光值A,計(jì)算ΔA=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管 設(shè)一個(gè)對(duì)照管。 |
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=13.226x+0.0011,R2=0.9998;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/ml),y 為吸光值ΔA。酶活定義:每克土樣每天催化產(chǎn)生 1μmol 對(duì)硝基苯酚的酶量為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土樣)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T
=16.33×(ΔA-0.0011)÷W
V 樣總:加入提取液體積,1ml; V 反總:反應(yīng)總體積,0.6ml;V 樣:反應(yīng)中樣品體積,0.2ml; W:樣品質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,20min=1/72d;
ΔA 控制在 0.01-2 范圍內(nèi),若ΔA 大于 2,可適當(dāng)減小樣本量。標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為:0.01μmol/ml-0.5μmol/ml。
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